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近期多地遭遇臺風、暴雨洪澇災害,潮濕積水、溫差波動的惡劣環境,讓不少實驗室的儲存環境受到影響,大家也紛紛擔憂:
受潮、久放的實驗試劑會不會直接失效?很多封存許久的老舊試劑、留存多年的抗體是否徹底無法使用?
其實實驗室的試劑「保質期」,從來都不是絕對的標準答案。
喬治 · 卡托雷蒂,一位來自意大利的生物學家,用他的研究為我們揭開了這一謎題。
26 歲抗體「老將」,能否準確檢測?
意大利生物學家喬治 · 卡托雷蒂(Giorgio Cattoretti)和他的同事們對 38 個在冷藏環境中(4°C)保存了 12 至 26 年的病理學診斷抗體的有效性進行了測試,并發現這些抗體的有效性并沒有因為長期擱置而被削弱。
具體研究方法、結果如下:
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圖源:論文截圖
四個獨立的實驗室測試了一批在 4°C 下保存了 12 至 26 年的診斷抗體。
包括 1986 年的抗角蛋白抗體 AE-1 和 AE-3、1992 年的抗角蛋白抗體、1993 年的抗 PCNA、1993 年的抗胰島素多克隆抗體、1994 年的抗 LN5、1995 年的抗 MAC387、1996 年的抗彈性酶、1998 年的 HRP 偶聯的抗 kappa 輕鏈、2000 年的抗 LN1 和抗 LN2。
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圖源:論文截圖
受監測的抗體類型包括多克隆和單克隆抗體,可能存在批次、動物或亞克隆的差異。
所有試劑都保存在 4°C,含有抗菌劑、緩沖液和蛋白質穩定劑或培養基。使用未過期的抗體作為對照組進行測試和比較。
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圖源:網絡
老抗體帶來 89% 的成功檢測
結果不負眾望!26 歲高齡的抗體表現出了不錯的成績。
38 個抗體樣本中有 34 個能夠在常規處理的人組織上成功染色,也就是 89% 的成功檢測率,且過期抗體的最佳工作稀釋度與它們最初供應時的稀釋度相匹配。
結果還顯示 ,所有抗體都能染色表達水平廣泛的組織抗原,包括一些非常弱的表達。
使用過期抗體得到的結果與使用當前未過期試劑的結果無法區分。以下是多種組織樣本使用過期抗體染色的免疫反應性。
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圖源:論文截圖
圖表中包括了結腸癌轉移到肝臟的樣本(AE1 和 AE3 染色)、唾液腺的 EMA 染色、結腸黏膜的細胞角蛋白染色、結腸黏膜下層的肌動蛋白染色、腭扁桃體的 CD34 抗體染色、野生型和突變型 TP53 的染色、CD45 抗體染色的扁桃體組織等。
看來,過期抗體在不同組織和不同抗原上的應用效果都不錯。
回歸現實,過期試劑仍要謹慎用
但其實,實驗歸實驗,抗體歸抗體。這一結果并不能代表全部過期試劑有效。實驗室試劑的保質期因其類型和成分的不同而有很大差異。
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圖源:網絡
實驗室部分常用試劑的保質期還是非常短的,比如酶通常在 -20°C 或 -80°C 下保存,保質期可能從幾個月到幾年不等,但活性可能會隨時間降低。
血清需要在 -20°C 以下保存,通常保質期為 1—2 年,但長期保存后可能需要檢測其效價。
而緩沖液(如 PBS):在 2-8°C 下保存,保質期可能從數月到一年,取決于是否添加防腐劑。
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* 備注:具體每種試劑的存儲和使用條件應根據制造商提供的具體說明來確定。
最后,還是建議大家定期檢查試劑的有效性,并根據實驗室標準操作程序(SOPs)來處理和存儲這些試劑。
你用過年齡最大的試劑是什么?哪一年的?你拿到理想結果了嗎?請在評論區留言吧!
題圖來源:Stephen Barnes/Science/Alamy
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