胡檢？亂檢？誤檢？為何東風(fēng)螺，成為檢測亂象的重災(zāi)區(qū)？

最近，小編在檢測過程當(dāng)中發(fā)現(xiàn)，市面上東風(fēng)螺的PCR試劑是很少的，因此，一些檢測點卻用蝦的試劑，或者是魚的試劑來檢查東風(fēng)螺，這一點讓小編也感到很無語。這不僅讓養(yǎng)殖戶花了冤枉錢，還讓一些潛在的病害滋生，給養(yǎng)殖帶來風(fēng)險。

今天小編用一些案例，告訴大家一些案例，供大家參考。文末還提供小編整理的東風(fēng)螺檢測建議（包括：如何通過檢測，判斷東風(fēng)螺的優(yōu)劣的技巧，供大家參考。）

一、跨物種混用檢測試劑：

1、用蝦類EHP試劑盒檢測東風(fēng)螺孢子蟲：EHP只感染對蝦，無法檢出東風(fēng)螺致病單孢子蟲，出現(xiàn)假陰性；

大家可以通過上圖可以看出，養(yǎng)殖戶送東風(fēng)螺過來檢測蝦肝腸孢蟲（EHP）？這沒有啥意義的，因為蝦肝腸孢蟲（EHP）是對蝦專屬微孢子蟲，自然易感宿主只有南美白對蝦、斑節(jié)對蝦、羅氏沼蝦等蝦類，僅寄生蝦肝胰腺上皮細(xì)胞 。因此，如果想檢測東風(fēng)螺，那么可以選擇高發(fā)的孢子蟲（單孢子蟲），它和EHP基因序列完全不同。

2、VNNV試劑盒判定東風(fēng)螺病害：NNV不侵染螺體，陽性僅代表水體污染，不能診斷螺發(fā)病，因此，養(yǎng)殖戶想檢測東風(fēng)螺，需要選擇東風(fēng)螺專用試劑盒。

上圖，就是有檢測點，采用RS來檢測東風(fēng)螺。其實，一點意義都沒有。RS全稱是RSIV（Red Sea Bream Iridovirus）真鯛虹彩病毒的行業(yè)簡寫，配套熒光PCR試劑盒僅針對海水魚類專用。他們易感宿主：石斑、金鯧、真鯛、鱸魚、紅鯛等30余種海水硬骨魚類；特別是引物探針只靶向魚類RSIV保守基因，僅識別魚類體內(nèi)增殖的病毒，所以，拿來篩查東風(fēng)螺的病害，真的是太不專業(yè)了。

3、蝦白斑WSSV、EMS、蝦虹彩DIV1試劑盒拿去測魚/東風(fēng)螺，完全無診斷價值；

4、AbHV病毒試劑盒用來檢測魚蝦：僅貝類、東風(fēng)螺易感，魚類、對蝦不會感染該病毒，結(jié)果無意義。所以，該病毒PCR試劑可以用于來排查東風(fēng)螺的病害。

5、魚蝦螺混養(yǎng)塘檢出交叉病原，誤判定當(dāng)前養(yǎng)殖品種患病。比如東風(fēng)螺檢出VNNV核酸，只是濾食富集水體病毒，螺本身不會發(fā)病，養(yǎng)殖戶盲目消殺造成應(yīng)激。

二、核酸類型選錯（DNA/RNA不分，直接檢測失效）

1、DNA病毒用RNA試劑盒，RNA病毒用普通DNA試劑盒

RNA病原：VNNV神經(jīng)壞死病毒、RV彈狀病毒、CMNV偷死病毒，需要反轉(zhuǎn)錄RT-PCR試劑盒；普通DNA PCR無法擴增，一律假陰性；

DNA病原：弧菌、WSSV白斑、AbHV皰疹病毒、EHP、虹彩病毒，普通熒光PCR即可，無需反轉(zhuǎn)錄；

2.、混用體系：一套試劑同時檢測DNA、RNA病原，擴增條件不匹配，Ct值失真、漏檢潛伏病原，那么最后，檢測就沒有意義。

三、病害場景與試劑盒類型選錯

1、只買普通定性試劑盒，忽略定量需求：

日常塘口預(yù)警、判斷感染輕重需要熒光定量qPCR，只能定性的普通終點PCR，只能看有無病原，無法區(qū)分高載量爆發(fā)風(fēng)險、低載量潛伏感染。

2、現(xiàn)場流動檢測選液體試劑，實驗室批量檢測用凍干試劑盒：

很多檢測點無冷藏條件，卻用液體試劑：試劑降解，檢測結(jié)果失真，有些檢測點為了降低成本使用液體試劑，但是保存不當(dāng)，試劑也非常容易失真；

3、混淆單重、多重試劑盒：

為了節(jié)省成本，很多檢測點選用多種病原聯(lián)檢直接用多重試劑盒，樣本載量過低時發(fā)生引物競爭，出現(xiàn)漏檢；發(fā)病溯源優(yōu)先單重特異性試劑盒，精準(zhǔn)度更高。

四、養(yǎng)殖品種檢測優(yōu)先級錯誤

1、主次病原顛倒，只查次要條件菌，漏檢核心致死病原

東風(fēng)螺只測柱狀黃桿菌、絲囊霉，不測哈維氏弧菌、AbHV；

對蝦頻繁檢測鏈球菌、氣單胞菌，忽視WSSV、EHP、EMS、副溶高致病弧菌；

2、人畜共患病原遺漏：成品不檢測霍亂弧菌、創(chuàng)傷弧菌，存在商檢扣押風(fēng)險。

五、劑型、性能忽視帶來的檢測誤差

1、貪圖低價選用無特異性引物試劑盒，出現(xiàn)交叉假陽性：

近緣菌種區(qū)分不開：比如無法區(qū)分副溶弧菌與普通溶藻弧菌，健康塘口誤判強致病弧菌超標(biāo)，盲目用藥。

2、忽視試劑盒靈敏度，潛伏期漏檢：

普通試劑盒靈敏度低，僅能檢出發(fā)病中后期高載量病原；苗期預(yù)檢、潛伏篩查必須選用高靈敏度探針法試劑盒。

3、忽視保存條件差異

凍干型試劑盒誤以為可以長期常溫存放，但是長期高溫存放酶活性衰減；液體探針試劑隨意常溫運輸，核酸擴增失效。

六、配套搭配與實操認(rèn)知錯誤

1、只用水體樣本檢測，不用檢測東風(fēng)螺組織內(nèi)臟樣本：

水體只能反映環(huán)境，病原潛伏在肝胰腺、鰓、內(nèi)臟內(nèi)，水體陰性不代表養(yǎng)殖生物不帶菌，造成漏判；

2、檢測時機錯誤，用藥、消毒后采樣送檢：

有些養(yǎng)殖戶在送檢的時候，使用消毒劑、抗生素壓制病原載量，試劑盒檢出假陰性，無法反映塘口真實感染情況；

3、一套試劑盒覆蓋全品類養(yǎng)殖，不分魚蝦螺單獨配套檢測組合，數(shù)據(jù)參考價值極低。

PS：大家若是想要小編最新整理的東風(fēng)螺檢測建議（內(nèi)容包括：如何正確檢測，如何通過檢測來選好東風(fēng)螺苗），加下方微信，小編可以發(fā)給您。